盐析法是一种常见的蛋白质纯化技术,其基本原理是通过改变溶液中盐的浓度来影响蛋白质在水中的溶解度,从而达成蛋白质的离别与纯化。在低盐浓度条件下,大部分蛋白质可以好地溶于水中,由于此时水分子可以有效地包围并稳定蛋白质表面的亲水基团,促进蛋白质维持溶解状况。然而,当向溶液中加入适量的中性盐(如硫酸铵、氯化钠等)时,伴随盐浓度的增加,溶液中的离子强度增大,这会降低水分子与蛋白质之间的相互用途力。
具体来讲,高浓度的盐离子可以角逐性的结合到原本围绕在蛋白质表面的水分子上,从而减弱了蛋白质|水的相互用途。当这种相互用途被显著削弱后,蛋白质之间的疏水基团暴露出来,彼此之间有哪些用途力增强,致使蛋白质分子开始聚集并最后从溶液中沉淀下来。这一过程即为盐析。
通过调节不一样的盐浓度可以达成对不同性质(如大小、形状和表面电荷等)的蛋白质进行选择性沉淀,从而达到离别的目的。在实质操作过程中,一般会先将混合物中的大多数杂蛋白去除掉,然后再越来越减少盐浓度使目的蛋白重新溶解出来,以获得较为纯净的目的蛋白样品。
除此之外,在应用盐析法时还需要考虑温度、pH值等原因的影响,由于这类条件也会干扰蛋白质的溶解度。总的来讲,盐析是一种简单且有效的蛋白质纯化方法,在生物化学研究中有着广泛的应用。
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