细菌学诊断常用办法主要包含以下几大类:
形态学检查是基础办法之一。直接涂片镜检简单迅速,取标本直接涂片、染色后在显微镜下察看细菌的形态、大小、排列及染色性等。比如,在痰液中找到抗酸染色阳性的细长杆菌,能够帮助初步诊断肺结核。而特殊染色法如鞭毛染色、荚膜染色等,能更明确地察看细菌特殊结构,为细菌辨别提供要紧线索。
离别培养是重点步骤。依据细菌的营养需要、成长条件等,选择适合的培养基进行培养。常见的有基础培养基如肉汤培养基,营养培养基如血琼脂平板等。将标本接种在培养基上,在适合的温度、气体环境下培养肯定时间,察看菌落的大小、形态、颜色、表面性状、边缘状况等特点,可初步判断细菌的类型。比如,金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上可形成金黄色、圆形、凸起、表面光滑、周围有溶血环的菌落。
生化试验可对细菌进行进一步鉴别。不同细菌具备不一样的酶系统,通过测试细菌对各种底物的代谢用途及代谢产物,能辨别细菌。如糖发酵试验,可测试细菌分解糖类产酸产气的能力;吲哚试验可测试细菌能否分解色氨酸产生吲哚。
血清学试验借助抗原与抗体特异性结合的原理。用已知的抗体测试未知的细菌抗原,或用已知的细菌抗原测试病人血清中的抗体。如肥达试验,用伤寒沙门菌的菌体抗原(O)和鞭毛抗原(H)等测试病人血清中相应的抗体,辅助诊断伤寒。
动物实验可用于确定细菌的致病性、测定细菌的毒力等。将待检细菌接种于易感动物体内,察看动物的发病状况、病理变化等。如将破伤风杆菌接种于小鼠,可察看到小鼠出现典型的破伤风症状。
分子生物学技术近年来飞速发展。核酸杂交技术借助核酸分子碱基互补配对的原理,测试细菌特定的核酸序列;聚合酶链反应(PCR)可在体外迅速扩增细菌的特定核酸片段,具备灵敏度高、特异性强等优点,能迅速准确地测试出细菌。
这类办法相互配合、相互补充,在细菌学诊断中发挥着要紧用途。
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